Цусны соронзон геномын ДНХ -ийн иж бүрдэл

A-1 Анхны дээжинд эс эсвэл вирусын концентраци багатай-Эсийн болон вирусын концентрацийг баяжуулна.

А-2 Дээжийн задрал хангалтгүй-Дээжийг лизисийн буфертай сайтар хольж хутгаагүй болно. Пульс эргүүлэх замаар 1-2 удаа сайтар холихыг зөвлөж байна. - Протеиназа К -ийн идэвхжил буурснаас үүдэлтэй эсийн задрал хангалтгүй байна - Халуун усанд орох хугацаа хангалтгүй байгаагаас эсийн задрал хангалтгүй буюу уургийн задрал. Лизатын бүх үлдэгдлийг арилгахын тулд эдийг жижиг хэсгүүдэд хувааж, усанд орох хугацааг уртасгахыг зөвлөж байна.

А-3 ДНХ-ийн шингээлт хангалтгүй байна. -Лизатыг эргүүлэх баганад шилжүүлэхээс өмнө 100% этилийн спиртийн оронд этанол эсвэл бага хувь нэмээгүй.

A-4 Цэвэрлэх буферын рН утга хэт бага байна. -РН-ийг 8.0-8.3 хооронд тохируулна.

Цайруулагч бодис дахь этанолын үлдэгдэл.

- Цайруулагч бодис дотор PW угаалгын буфер үлдэгдэл байдаг. Этанолыг эргүүлэх баганыг 3-5 минутын турш центрифуг хийж, дараа нь өрөөний температурт эсвэл 50 ℃ инкубаторт 1-2 минутын турш хийж арилгаж болно.

А-1 Дээж нь шинэлэг биш юм. - Дээжийн ДНХ -ийн доройтол байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд эерэг дээж ДНХ -ийг хяналт болгон гаргаж ав.

А-2 Урьдчилсан зохисгүй эмчилгээ. - Хэт их шингэн азот нунтаглах, чийг авах, эсвэл хэт их хэмжээний дээж авах зэргээс үүдэлтэй.

Янз бүрийн дээжийг урьдчилан эмчлэх нь өөр өөр байх ёстой. Ургамлын дээжийн хувьд шингэн азотыг сайтар нунтаглахаа мартуузай. Амьтны дээжийн хувьд шингэн азотыг нэгэн төрлийн болгож эсвэл сайтар нунтаглана. G+ бактери, мөөгөнцөр гэх мэт хагарахад хэцүү эсийн ханатай дээжийн хувьд эсийн ханыг эвдэхийн тулд лизоцим, литиказа эсвэл механик аргыг ашиглахыг зөвлөж байна.

4992201/4992202 Ургамлын геномын ДНХ-ийн багц нь олборлоход хлороформ шаарддаг баганад суурилсан аргыг ашигладаг. Энэ нь ургамлын төрөл бүрийн дээж, түүнчлэн ургамлын хуурай нунтаг хийхэд тохиромжтой. Hi-DNAsecure Plant Kit нь баганад суурилсан боловч фенол/хлороформ олборлох шаардлагагүй тул аюулгүй, хоргүй болгодог. Энэ нь полисахарид ба полифенолын өндөр агууламжтай ургамалд тохиромжтой. 4992709/4992710 DNAquick Plant System нь шингэн дээр суурилсан аргыг ашигладаг. Фенол/хлороформ олборлох шаардлагагүй. Цэвэршүүлэх журам нь энгийн бөгөөд хурдан бөгөөд түүвэр эхлэх хэмжээ хязгааргүй тул хэрэглэгчид туршилтын шаардлагын дагуу хэмжээг уян хатан тохируулах боломжтой. Өндөр ургацын тусламжтайгаар том хэмжээтэй gDNA фрагментийг авах боломжтой.

Геномын ДНХ -ийг TIANamp Цусны ДНХ -ийн иж бүрдлээр янз бүрийн хэмжээтэй хүний ​​бүтэн цусны дээжээс гаргаж авсан. Үр дүн нь дараах байдалтай байна. Үр дүнг зөвхөн лавлагаа болгон жагсаасан бөгөөд олборлолтын бодит үр дүн нь дээжийн нөхцөл байдлаас хамаарна.

Цусны бүлэгнэлтийн ДНХ олборлолтыг эдгээр хоёр иж бүрдэлд багтсан урвалж ашиглан протоколыг цусны бүлэгнэлтийн ДНХ -ийг гаргаж авах тусгай зааврын дагуу өөрчилж болно. Цусны бүлэгнэлтийн ДНХ авах протоколын зөөлөн хуулбарыг хүсэлтийн дагуу гаргаж болно.

Шинэхэн дээжийг 1 мл PBS, ердийн давсны уусмал эсвэл TE буфераар түр зогсооно. Дээжийг нэгэн төрлийн болгогчоор бүрэн нэгэн төрлийн болгож, тунадасыг центрифугээр хуруу шилний ёроолд цуглуулна. Илүүдэл бодисыг зайлуулж, тунадасыг 200 мкл буфер GA ашиглан дахин сэлбэнэ. Дараах ДНХ цэвэршүүлэлтийг зааврын дагуу хийж болно.

Плазм, ийлдэс, биеийн шингэний дээжин дэх gDNA -ийг цэвэршүүлэхийн тулд TIANamp Micro DNA Kit -ийг ашиглахыг зөвлөж байна. Ийлдэс/плазмын дээжээс gDNA вирусыг цэвэршүүлэхийн тулд TIANamp Virus DNA/RNA Kit -ийг ашиглахыг зөвлөж байна. Цусны сийвэн ба сийвэнгийн дээжээс бактерийн gDNA -ийг цэвэршүүлэхийн тулд TIANamp Bacteria DNA иж бүрдлийг ашиглахыг зөвлөж байна (эерэг бактерийн хувьд лизоцим оруулах шаардлагатай). Шүлсний дээж авахын тулд Hi-Swab DNA Kit, TIANamp Bacteria DNA Kit-ийг санал болгож байна.

Мөөгөнцрийн геномыг гаргаж авахын тулд DNAsecure Plant Kit эсвэл DNAquick Plant System -ийг ашиглахыг зөвлөж байна. Мөөгөнцрийн геномыг гаргаж авахын тулд TIANamp мөөгөнцрийн ДНХ-ийг ашиглахыг зөвлөж байна (литиказыг өөрөө бэлтгэсэн байх ёстой).