TGuide эсүүд/эдүүд/ургамлын РНХ -ийн иж бүрдэл

A-1 Эсийн задрал эсвэл нэгэн төрлийн болгох нь хангалтгүй юм

---- Дээжийн хэрэглээг багасгах, лизис буферын хэмжээг нэмэгдүүлэх, нэгэн төрлийн болгох, задлах хугацааг нэмэгдүүлэх.

А-2 Дээжийн хэмжээ хэт том байна

---- Ашигласан дээжийн хэмжээг багасгах эсвэл лизис буферийн хэмжээг нэмэгдүүлэх.

А-1 эсийн задрал эсвэл гомогенжилт хангалтгүй байна

---- Дээжийн хэрэглээг багасгах, лизис буферын хэмжээг нэмэгдүүлэх, нэгэн төрлийн болгох, задлах хугацааг нэмэгдүүлэх.

А-2 Дээжийн хэмжээ хэт том байна

---- Боловсруулах хамгийн дээд хүчин чадлыг харна уу.

А-3 РНХ нь баганаас бүрэн ялгардаггүй

---- RNase агуулаагүй ус нэмсний дараа центрифуг хийхээс өмнө хэдэн минут байлгана.

Цайруулагч бодис дахь А-4 этанол

---- Угаасны дараа дахин центрифуг хийж, угаалгын буферыг аль болох зайлуулна.

А-5 Эсийн өсгөвөрлөх орчныг бүрэн арилгаагүй болно

---- Нүд цуглуулахдаа өсгөвөрлөгчийг аль болох зайлуулах хэрэгтэй.

А-6 RNAstore-д хадгалагдаж буй эсүүд үр дүнтэй центрифугддэггүй

---- РНХ-ийн дэлгүүрийн нягтрал нь дундаж эсийн өсгөвөрлөх орчноос их; Тиймээс төвөөс зугтах хүчийг нэмэгдүүлэх хэрэгтэй. 3000x гр жинтэй центрифуг хийхийг зөвлөж байна.

А-7 РНХ-ийн агууламж багатай, дээжинд элбэг дэлбэг байна

---- Эерэг дээж ашиглан дээжнээс үүдэлтэй ургац бага байгаа эсэхийг тогтооно.

A-1 Материал нь шинэлэг биш юм

---- Шинэхэн эдийг нэн даруй шингэн азотод хадгалах буюу олборлолтын үр нөлөөг хангахын тулд нэн даруй РНХ-ийн урвалж руу хийнэ.

А-2 Дээжийн хэмжээ хэт том байна

---- Дээжийн хэмжээг багасгах.

A-3 RNase-ийн бохирдолn

---- Хэдийгээр иж бүрдэлд багтсан буфер нь RNase агуулаагүй боловч олборлох явцад RNase-ийг бохирдуулахад амархан тул болгоомжтой харьцах хэрэгтэй.

А-4 Электрофорезын бохирдол

---- Электрофорезийн буферийг сольж, хэрэглээний болон ачаалах буфер нь RNase-ийн бохирдолгүй байгаа эсэхийг шалгаарай.

А-5 Электрофорезын хэт их ачаалал

---- Дээжийг ачаалах хэмжээг багасгах, худаг бүрийн ачаалал 2 мкг-аас хэтрэхгүй байх ёстой.

A-1 Дээжийн хэмжээ хэт том байна

---- Дээжийн хэмжээг багасгах.

А-2 Зарим дээжид ДНХ-ийн агууламж өндөр байдаг тул DNase-ийн тусламжтайгаар эмчилж болно.

---- RNase-free DNase эмчилгээг олж авсан РНХ-ийн уусмалд хийж гүйцэтгэх ба РНХ-ийг эмчилгээний дараа дараагийн туршилтанд шууд ашиглах, эсвэл РНХ-ийн цэвэршүүлэх иж бүрдэл ашиглан цаашид цэвэршүүлэх боломжтой.

Шилэн эдлэлийн хувьд 150С -т 4 цагийн турш жигнэнэ. Хуванцар савны хувьд 0.5 М NaOH-д 10 минутын турш дүрж, дараа нь RNase агуулаагүй усаар сайтар зайлж, ариутгаад RNase-ийг бүрэн арилгана. Туршилтанд ашигласан урвалж буюу уусмал, ялангуяа ус нь RNase агуулаагүй байх ёстой. Бүх урвалж бэлдмэлд RNase агуулаагүй усыг хэрэглэнэ (цэвэр шилэн саванд ус нэмж, 0.1% -ийн эцсийн концентрацид DEPC нэмж, нэг шөнийн турш сэгсэрч, автоклав хийнэ).